Les effets du pH sur la catéchol-oxydase

March 25

Les enzymes possèdent une structure tridimensionnelle définie. Tout changement de cette structure entraîne une modification de l'activité de l'enzyme. Le pH du mélange de réaction modifie cette structure et, par conséquent, l'activité. Chaque enzyme a un pH optimal où il présente une activité maximale. Des différences significatives de ce pH entraînent des modifications dans la structure tridimensionnelle de l'enzyme qui réduisent son activité. Catéchol oxydase enzyme a un pH optimal d'environ 7.

À propos de la catéchol-oxydase

Le catéchol est oxydé par la catéchol-oxydase en présence d'oxygène pour former benzoquinone, qui, lors de l'exposition à l'air, forme mélanine. Cette enzyme est également connu sous d'autres noms, tels que la tyrosinase, diphénol oxydase et la polyphénol oxydase. Pommes de terre, les pommes et les bananes contiennent la catéchol-oxydase qui agit sur le catéchol incolore et le convertit à la mélanine de couleur brune. Le brunissement qui se produit lorsque vous coupez et exposer ces articles à l'air est un résultat de cette réaction.

Extraction de la catéchol-oxydase

Catéchol oxydase peut être extrait à partir de pommes de terre ou des bananes. Mash une banane avec deux fois le volume d'eau dans un mortier et un pilon. Alternativement, mélanger une banane avec de l'eau pour obtenir l'extrait catéchol oxydase. Filtrer à travers le beurre mousseline et conserver au réfrigérateur. Si vous utilisez des pommes de terre, pelez et morceau eux, puis mélanger à une vitesse élevée en utilisant 700 ml d'eau distillée froide. Filtrez ce jus de pomme de terre à travers une étamine et réfrigérer.

Détails expérimentaux

Préparer les solutions tampons à des valeurs de pH de 2, 4, 6, 7 et 8. Étiquette cinq tubes à essai avec ces valeurs de pH. Remplir chaque tube à un quart de la capacité tampon respective. Ajouter 10 gouttes de catéchol oxydase dans l'extrait de chacun de ces tubes, suivis par 10 gouttes de catéchol. Agiter les tubes et notez la couleur de chaque tube sur une échelle de 0 à 5 où 0 indique l'absence de couleur et 5 indique, une couleur brun foncé. Continuer secouer les tubes et noter la couleur toutes les cinq minutes pour les 20 prochaines minutes.

Résultat Interprétation

Utilisez les données que vous obtenez pour la lecture de 20 minutes pour tracer un graphique. Sur l'axe des X, indique le pH des tampons. Sur l'axe Y, indiquent les intensités de couleur allant de 0 à 5. Pour chaque valeur de pH, marquent l'intensité de la couleur et rejoignent ces marques pour obtenir le graphe final. Localisez le pic de ce complot et d'identifier le pH optimal pour la réaction catéchol oxydase. Pourvu que vous avez effectué l'expérience correctement, la valeur de pH optimal sera 7. A pH 7, l'enzyme est la plus active et catalyse l'oxydation du catéchol pour donner la couleur brun foncé rapidement.

Précautions

Bananes ainsi que les pommes de terre contiennent catéchol. Par conséquent, il est possible de se faire une partie de cette oxydée pendant la réaction, contribuant à l'intensité de la couleur vous observé. Pour éviter cette réaction, gardez l'extrait catéchol oxydase sur un bloc de glace avant de l'ajouter dans chaque tube. Catéchol est toxique, donc vous assurer de ne lui permettent pas de contact avec la peau. Ne pas pipeter des solutions de catéchol et se il ya un déversement, porter des gants pour nettoyer en utilisant des serviettes en papier.